illustra™ Hot Start Master Mix is a 2X premixed formulation that can effectively reduce non specific priming and primer-dimer formation during PCR. illustra™ Hot Start Master Mix uses a novel hot start method called primer sequestration.
- Rekombinantes Hot Start-Aktivatorprotein besetzt Primer vor der PCR, sodass unspezifisches Priming und Primerdimerbildung verringert werden
- Schnelle Hot Start-Aktivierung erhält die gleichbleibende Qualität der Probe und vermeidet übermäßige vorherige Wärmebehandlung
- Vermeidung des Risikos von Kontamination durch Säugerzellen im Zusammenhang mit Hot Start-Antikörpern
- Praktische und gebrauchsfertige Mischung spart Zeit und verringert experimentelle Abweichungen
- Geeignet für alle Standard-PCR-Reaktionen wie Multiplex-PCR sowie Reaktionen, die unspezifische Amplifikationen oder Primerdimerbildung aufweisen
Illustra™ Hot Start Master Mix vereint rekombinante Taq DNA-Polymerase hoher Qualität, ein rekombinantes Hot Start-Aktivatorprotein und Nukleotide in einem proprietären Reaktionspuffer. Diese gebrauchsfertige Mischung bietet robuste und zuverlässige Leistung für anspruchsvolle PCR-Anwendungen, in denen hohe Spezifität und hohe Empfindlichkeit entscheidend für den Erfolg sind. Die Mischung enthält keine Taq-Antikörper, wodurch das Risiko einer Kontamination durch Säugerzellen beseitigt wird. Da die Polymerase zudem nicht chemisch inaktiviert ist, ist keine übermäßige vorherige Wärmebehandlung erforderlich. Somit wird das Risiko einer Beschädigung wertvoller DNA-Proben durch wärmeinduzierte Depurinierung verringert. Das Endergebnis einer Verwendung von Illustra™ Hot Start Master Mix ist eine robustere und zuverlässigere Amplifikation der Ziel-Ampliconen und ein höherer Ertrag im Vergleich zu herkömmlichen Hot Start Master Mix Produkten.
Hot Start Master Mix was functionally tested:
• To demonstrate prevention of primer-dimer formation during PCR amplification of numb locus fragment using oligonucleotide primers with 3-bp overlap at the
3, terminus when compared to reactions without Hot Start Activator protein.
• To demonstrate that polymerase activity is blocked by 90% or greater when incubated for 4 h at 25 °C in the presence of DNA polymerase, dNTPs, and polymerase substrate compared to reactions without Hot Start Activator protein.
• To ensure that Hot Start Master Mix is free of ribonucleases and double- and single-stranded DNA exonucleases and endonucleases. Standard assays were performed, and all of these activities were found to be negligible.
Storage: –20 °C
Bestellinformation: Larger custom pack sizes are available on request, please inquire.
Lieferumfang: Hot Start Master Mix contains sufficient reagent for 100 PCR reactions in 50 μl final volume (4×0,625 ml) and is supplied as a 2X concentrate solution:
20 mM Tris-HCl (pH 8.6), 100 mM KCl, 3 mM MgCl₂, 0,4 mM dNTPs (dATP, dCTP, dGTP, dTTP), 50 units/ml Taq DNA Polymerase, Hot Start Activator protein, stabilisers.
