Fetusgewebelysat (14 Tage alt) wurde durch Homogenisierung in modifiziertem RIPA-Puffer (150 mM Natriumchlorid, 50 mM Tris-HCl, pH 7,4, 1 mM Ethylendiamintetraessigsäure, 1 mM Phenylmethylsulfonylfluorid, 1% Triton X-100, 1% Natriumdesoxycholsäure, 0,1% Natriumdodecylsulfat, 5 μg/ml Aprotinin, 5 μg/ml Leupeptin) hergestellt.
Gewebe- und Zelltrümmer wurden durch Zentrifugation entfernt. Die Proteinkonzentration wurde mit einem Bio-Rad-Proteinassay bestimmt. Das Produkt wurde 5 Minuten lang in 1 × SDS-Probenpuffer (50 mM Tris-HCl pH 6,8, 12,5% Glycerin, 1% Natriumdodecylsulfat, 0,01% Bromphenolblau) gekocht. mit 5% β-Mercaptoethanol.