Diese magnetischen Agarose-Beads bestehen aus stark quervernetzten Agarose-Beads mit eingebettetem Magnetit und kovalent gebundener Nitrilotriessigsäure (NTA) als Chelator, beladen mit zweiwertigen Nickelionen. Sie bieten eine schnelle, bequeme Methode zur Aufreinigung von His-getaggten rekombinanten Proteinen.
- Hohe Kapazität: Ausreichend sowohl für Routine- als auch anspruchsvolle Reinigungsverfahren
- Bindet >70 mg 6xHis-getaggtes Protein pro ml des abgesetzten Resins
- Hohe Leistung und Reproduzierbarkeit: Nicht aggregierende superparamagnetische Magnetit(Fe3O4)-Beads bieten außergewöhnliche Einheitlichkeit sowohl für manuelle als auch für automatisierte HTS-Reinigungsanwendungen
- Geringe unspezifische Bindung: Optimiertes Aufreinigungsprotokoll sorgt für bessere Reinigung getaggter Proteine
- Vielseitig einsetzbar: Proteine können unter nativen oder denaturierenden Bedingungen aufgereinigt werden
- Kompatibel: Können mit Thermo Scientific Zelllyse-Reagenzien und einer Vielzahl von Pufferzusätzen verwendet werden
Die Dichte des Liganden auf dem magnetischen Agarose-Bead sorgt für eine ähnliche oder gar bessere Bindekapazität als herkömmliche Agarose-Resins, mit dem zusätzlichen Vorteil der magnetischen Handhabung. Magnetische Agarose-Beads sind ein wertvolles Hilfsmittel für die Aufreinigung von mehrfach His-getaggten Proteinen im kleinen Maßstab (~1 mg) und für die Optimierung der Expressions- und Aufreinigungsbedingungen, die für Aufreinigungen im größeren Maßstab mittels Agarose-Chromatographie erforderlich sind.
Die Beads werden mit Zelllysat, das His-getaggtes Protein enthält, inkubiert und anschließend magnetisch vom Überstand getrennt – entweder manuell oder automatisch mit einem Instrument wie dem Thermo Scientific™ KingFisher™ Flex Magnetpartikelprozessor. Unspezifisch gebundenes Protein kann ausgewaschen werden, bevor gebundenes His-getaggtes Protein mit Elutionspuffer abgetrennt wird. Automatische Instrumente sind besonders nützlich für Aufreinigungen mit höherem Durchsatz und die Prüfung der Aufreinigungsbedingungen.
